“社交悍匪"圖鑒

處理方法

“社交悍匪"來襲

     同學(xué)A：家人們誰懂啊，細(xì)胞比我先實(shí)現(xiàn)了"共同富裕"——培養(yǎng)基里面混進(jìn)了不請(qǐng)自來的"室友"，顯微鏡下那突如其來密密麻麻的黑點(diǎn)到底是什么啊?!

      同學(xué)B：本來心情好好的，一打開培養(yǎng)箱，天塌了，還我清澈的培養(yǎng)基，那渾濁的液體是鬧哪樣啊?!

      同學(xué)C：這細(xì)胞咋開始變形了，也不愛增殖了，實(shí)驗(yàn)還能不能開始了?!

     如果看到這些你也會(huì)產(chǎn)生共鳴的話，OK，沒錯(cuò)，“社交悍匪"——各種菌類入侵你細(xì)胞平靜的生活了，細(xì)胞被動(dòng)社交并接受“污染"這份令人感到bad的禮物，壞消息：細(xì)胞嘎了，好消息(自我安慰版)：意外的對(duì)照組出現(xiàn)了。

“社交悍匪"圖鑒

①細(xì)菌：入室搶-劫型社交

完-全不講武德，熱愛團(tuán)建，全面入侵。

    ?污染速度：爆發(fā)性污染，通常24-48h就能看到明顯變化，培養(yǎng)基可見明顯渾濁，多伴有腥臭味；

     ?鏡下特征：黑色細(xì)沙狀/桿狀，小而密且分布相對(duì)規(guī)則的菌體，偶見菌體運(yùn)動(dòng)，細(xì)胞狀態(tài)變差，嚴(yán)重時(shí)漂浮死亡；

     ?處理：首先選擇滅菌丟棄。若細(xì)胞珍貴且污染程度輕可嘗試挽救。

     1）物理沖洗：貼壁細(xì)胞棄培養(yǎng)基，使用PBS潤(rùn)洗細(xì)胞3-5次，每次10-20s，除去游離菌；

     2）高濃度抗生素沖擊：可先用20×雙抗浸泡細(xì)胞5min(若擔(dān)心損傷細(xì)胞，可以省略浸泡步驟)，再更換含有10×濃度雙抗的完-全培養(yǎng)基，將細(xì)胞放回培養(yǎng)箱培養(yǎng)12-24h；

     3）恢復(fù)正常培養(yǎng)：沖擊結(jié)束后，若污染有改善，恢復(fù)含1X雙抗的培養(yǎng)模式，無改善丟棄細(xì)胞。

圖1.細(xì)菌污染典型圖片(圖片源自客戶真實(shí)培養(yǎng)案例)

② 真菌：優(yōu)雅社交

真菌比較有格調(diào)，來的不緊不慢，喜歡在培養(yǎng)基進(jìn)行藝術(shù)創(chuàng)作。

?污染速度：早期培養(yǎng)基清亮無變化，一般3天左右可在液面、瓶壁或底部肉眼觀察到霉斑或者絮狀物。

酵母菌：白色/乳白色小顆粒或“酵母粉"樣沉淀，可形成黏液膜；

絲狀霉菌：白→綠→黑的“絨毛"“蜘蛛網(wǎng)"或絮狀菌落。

?鏡下特征：酵母型真菌污染物，卵圓形或短桿狀，常“出芽"形成典型“母子"或短鏈；霉菌污染鏡下可見細(xì)長(zhǎng)、分支的菌絲縱橫穿插，菌絲呈絲狀、管狀、樹枝狀等。

?處理：首先選擇丟棄，并對(duì)環(huán)境進(jìn)行消殺。貴重或不可-再生株可嘗試早期搶救，隔離培養(yǎng)物，使用兩性霉素B/制霉菌素等藥物測(cè)試。

圖2.真菌污染典型圖片(圖片源自客戶真實(shí)培養(yǎng)案例)

③支原體：陰暗型社交

在看似正常的過程中悄然實(shí)施破壞大計(jì)。

?判別要點(diǎn)：細(xì)胞狀態(tài)突然變差，增殖緩慢，甚至形態(tài)改變，拉絲或漂浮生長(zhǎng)，但培養(yǎng)基無變化，細(xì)胞間隙有時(shí)可看見不運(yùn)動(dòng)的黑點(diǎn)。

?鑒定方式：肉眼及鏡下均無法檢測(cè)到支原體的存在，必須借助試劑鑒定，推薦PCR法、顯色法、熒光染色法等相關(guān)檢測(cè)試劑盒。

?處理：較輕污染或珍貴細(xì)胞可用商用支原體清除劑嘗試挽救，一般周期2周左右，注意與其他培養(yǎng)物隔離，污染較重或清除劑無效立即棄掉且清除大環(huán)境。

圖3.支原體污染典型圖片(圖片源自客戶真實(shí)培養(yǎng)案例)

④黑膠蟲：薛定諤社交

身份撲朔迷離，出現(xiàn)后會(huì)像線面一樣繁殖。

?判別要點(diǎn)：培養(yǎng)基不渾濁，鏡下觀察，細(xì)胞周圍及培養(yǎng)液可見黑色的小點(diǎn)，原地打轉(zhuǎn)。隨著細(xì)培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)“小黑點(diǎn)"逐漸增多，更換培養(yǎng)液或洗滌細(xì)胞不能將其去除。細(xì)胞耗能明顯變快，但增殖較慢，狀態(tài)亦會(huì)變差，嚴(yán)重時(shí)死亡。

?處理：較輕污染且細(xì)胞狀態(tài)尚可時(shí)，使用黑膠蟲清除劑抑制污染，直至細(xì)胞狀態(tài)恢復(fù)，污染較重或清除劑無效立即棄掉且清除大環(huán)境。

如何阻止你的細(xì)胞“社交過度"？

無菌無菌無菌，重要的事情說三遍?。?！

??不戴手套碰試劑，不換細(xì)胞間專用實(shí)驗(yàn)服，更有big膽者炫水炫零食。

??槍頭倒吸不處理，還到處戳戳。

??高壓滅菌的衣服或試劑不烘干就放回細(xì)胞房。

??酒精時(shí)刻噴一切，噴手噴臺(tái)噴試劑。

??試劑分裝且單獨(dú)分配到人，不混用，不倒回。

??定期查崗：水浴鍋月月?lián)Q新，培養(yǎng)箱水盤常關(guān)注，超凈臺(tái)濾網(wǎng)要更換，環(huán)境清潔勤安排，支原體檢測(cè)切勿忘。

致所有在細(xì)胞房奮斗的家人們：

我們養(yǎng)的不只是細(xì)胞，是耐心、是細(xì)心、是面對(duì)培養(yǎng)基異常時(shí)那顆強(qiáng)-大的心臟。

愿你的細(xì)胞永遠(yuǎn)社恐，拒絕一切無效社交。

愿你的實(shí)驗(yàn)永遠(yuǎn)順利，數(shù)據(jù)漂亮到能發(fā)CNS