儲存條件
-20℃
中文名稱
乙酸激酶(ACK)活性檢測試劑盒其它
有效期
6個月
單位
盒
英文名稱
Acetokinase(ACK) Activity Assay Kit
檢測方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品型號：BC3170-50T/48S

更新時間：2025-08-26

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：1820

服務熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測硫代葡萄糖苷含量檢測生物堿含量檢測總氧化狀態(tài)（TOS）檢測 α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測植物銨態(tài)氮含量檢測試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測試劑盒細胞酸性磷酸酶細胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列信號系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

乙酸激酶（ACK）活性檢測試劑盒說明書
紫外分光光度法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC3170
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
提取液	液體50 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體30 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	粉劑×1瓶	2-8℃保存
試劑三	粉劑×2瓶	-20℃保存
試劑四	粉劑×2瓶	-20℃保存
試劑五	粉劑×1支	-20℃保存
試劑六	液體95 μL×1瓶	2-8℃保存
試劑七	液體110 μL×1瓶	-20℃保存
試劑八	粉劑×1瓶	2-8℃保存
試劑九	粉劑×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

提取液：臨用前將試劑九加入到提取液中，并于2-8℃保存；
試劑二：臨用前每瓶加入4 mL蒸餾水，充分溶解待用。用不完的試劑仍2-8℃保存；
試劑三：臨用前每瓶加入3 mL蒸餾水，充分溶解待用；用不完的試劑-20℃保存；
試劑四：臨用前每瓶加入2 mL蒸餾水，充分溶解待用；用不完的試劑-20℃保存；
試劑五：臨用前每支加入1 mL蒸餾水，充分溶解待用；用不完的試劑-20℃保存；
試劑六：液體置于試劑瓶內(nèi)EP管中。臨用前根據(jù)樣本量將試劑六、蒸餾水按43:457（V:V）的比例配制備用，現(xiàn)用現(xiàn)配；
試劑七：液體置于試劑瓶內(nèi)EP管中。臨用前根據(jù)樣本量將試劑七、蒸餾水按1:9（V:V）的比例配制備用，現(xiàn)用現(xiàn)配；
試劑八：臨用前加入5 mL蒸餾水，充分溶解待用。用不完的試劑仍2-8℃保存；
工作液：吸取0.3 mL 試劑二、1 mL試劑三、0.65 mL試劑四、0.2 mL試劑五、0.2 mL試劑六、0.2 mL試劑七、1 mL試劑八混勻，也可根據(jù)比例現(xiàn)用現(xiàn)配，于冰上備用。

產(chǎn)品說明：
ACK廣泛存在于生物體內(nèi)，催化乙酸和ATP生成乙酰磷酸和ADP，是細菌碳代謝和能量代謝的關鍵酶，尤其是在古細菌甲烷合成代謝中起著中樞作用。
測定原理如下：（1）ACK催化乙酸鈉和ATP生成乙酰磷酸和ADP，（2）*酸激酶催化ADP和PEP生成ATP和*酮酸，（3）乳酸脫氫酶催化丙*酸和NADH生成乳酸和NAD⁺，（4）在340nm下測定NADH氧化生成NAD⁺

速率，即可反映ACK活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
臺式離心機、紫外分光光度計、水浴鍋、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項：

測定過程中樣本和所有試劑在冰上放置，以免變性和失活。
比色皿中反應液的溫度必須保持37℃或25℃，取小燒杯一只裝入一定量的37℃或25℃蒸餾水，將此燒杯放入37℃或25℃水浴鍋中。在反應過程中把比色皿連同反應液放在此燒杯中。
ΔA大于1時，建議稀釋后測量，注意計算公式乘以稀釋倍數(shù)；ΔA小于0.01時，建議延長反應時間測量，注意計算公式變化。

實驗實例：

取0.1g腎臟組織樣本，加入1mL提取液進行勻漿研磨，取上清后按照測定步驟操作，測得計算ΔA測定=A測定1-A測定2=1.893-1.147=0.746，ΔA空白=A空白1-A空白2=1.453-1.448=0.005，ΔA=ΔA測定-ΔA空白= 0.746-0.005=0.741，按樣本質(zhì)量計算酶活得：

ACK（U/g 質(zhì)量）=536×ΔA÷W=536×0.741÷0.1=3971.76 U/g 質(zhì)量。

取500萬大腸桿菌加入1mL提取液超聲破碎，離心，取上清后按照測定步驟操作，測得計算ΔA測定=A測定1-A測定2=1.476-1.448=0.028，ΔA空白=A空白1-A空白2=1.453-1.448=0.005，ΔA=ΔA測定-ΔA空白=0.028-0.005=0.023，按細菌數(shù)量計算酶活得：

ACK（U/10⁴cell）=1.072×ΔA=1.072×0.023=0.0247 U/10⁴ cell。
參考文獻：

Mukhopadhyay S, Hasson M S, Sanders D A. A continuous assay of acetate kinase activity: Measurement of inorganic phosphate release generated by hydroxylaminolysis of acetyl phosphate[J]. Bioorganic chemistry, 2008, 36(2): 65-69.