儲存條件
-20℃
中文名稱
3-磷酸甘油醛脫氫酶活性檢測試劑盒微量法
有效期
6個月
單位
盒
推薦
若使用96孔板測定，需使用96孔UV板，推薦貨號YA0602
英文名稱
Glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogenase(GAPDH) Activity Assay Kit
別名
3-磷酸甘油醛脫氫酶試劑盒 GAPDH Kit 3-磷酸甘油醛脫氫酶(GAP

產(chǎn)品型號：BC2215-100T/96S

更新時間：2024-04-11

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：1291

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-微量法

水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測盒微量法生化試劑盒

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產(chǎn)品介紹

3-磷酸甘油醛脫氫酶（GAPDH）活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號: BC2215
規(guī)格:100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
提取液	液體100 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	粉劑×1瓶	-20℃保存
試劑二	液體20 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑三	液體12 µL×1瓶	2-8℃保存

溶液的配制：

試劑三：液體置于試劑瓶內(nèi)EP管中。根據(jù)用量按照試劑三:蒸餾水為3:100的體積比例充分混勻，現(xiàn)用現(xiàn)配；
工作液的配制：將試劑二全部倒入試劑一瓶中，充分溶解，根據(jù)需要取一定的量37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）預熱10min；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。

產(chǎn)品說明：
GAPDH（EC1.2.1.12）催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸，是糖酵解途徑的關(guān)鍵酶，與糖異生途徑、體內(nèi)血糖濃度的維持和糖尿病的發(fā)生密切相關(guān)，在機體糖、脂、蛋白代謝紊亂疾病中發(fā)揮重要作用。
3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3-二磷酸甘油酸。GAPDH逆向催化1,3-二磷酸甘油酸和NADH生成3-磷酸甘油醛、無機磷和NAD⁺，340nm處測定NADH的減少量可反映GAPDH活性的高低。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計/酶標儀、低溫離心機、水浴鍋、微量石英比色皿/96孔UV板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項：

當A1小于0.8或ΔA大于0.7時（96孔板為A1小于0.4或ΔA大于0.4），建議將樣本稀釋后再進行測定。
空白管為檢測各試劑組分質(zhì)量的檢測孔，正常情況下，變化不超過0.02。

實驗實例：

取0.1g兔腎臟加入1mL提取液，進行冰浴勻漿，然后8000g，4℃，離心20min，取上清置冰上，之后按照測定步驟操作，用微量石英比色皿測得計算ΔA測定管= A1測定-A2測定=0.9333-0.2289=0.7044，ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.9322-0.9274=0.0048，ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.6996，按樣本質(zhì)量計算酶活得：

GAPDH酶活（U/g質(zhì)量）=1072×ΔA÷W=7499.7 U/g質(zhì)量。

取0.1g三葉草加入1mL提取液，進行冰浴勻漿，然后8000g，4℃，離心20min，取上清置冰上，之后按照測定步驟操作，用微量石英比色皿測得計算ΔA測定管=A1測定-A2測定=1.0184-1.0042=0.0142，ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.9322-0.9274=0.0048，ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.0094，按樣本質(zhì)量計算酶活得：

GAPDH酶活（U/g質(zhì)量）=1072×ΔA÷W=100.77 U/g質(zhì)量。