儲存條件
2-8℃
中文名稱
支鏈淀粉含量檢測試劑盒微量法
有效期
6個月
單位
盒
英文名稱
Amylopectin Content Assay Kit
檢測方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規(guī)格
100T/96S
自備試劑
該試劑盒實驗過程中需自備試劑，詳情見網站說明書

產品型號：BC4275-100T/96S

更新時間：2024-04-15

廠商性質：生產廠家

訪問量：1042

服務熱線

010-50973130

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產品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

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產品介紹

支鏈淀粉含量檢測試劑盒說
明書
微量法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC4275
規(guī)格：100T/96S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
試劑一	液體110 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	液體100 mL×1瓶（自備）	2-8℃保存
試劑三	液體55 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑四	-	2-8℃保存
試劑五	液體2 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑六	液體10mL×1瓶	2-8℃保存
標準品	粉劑×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

試劑二：*100 mL自備。
試劑四：提供125 mL空瓶一個；將試劑三：H₂O =9 mL：91 mL混勻，現(xiàn)用現(xiàn)配，2-8℃保存半年。
標準品：10 mg支鏈淀粉。臨用前加入0.1 mL無水乙醇和0.9 mL試劑三，混勻后封口膜封口，沸水浴至溶解，即10 mg/mL的支鏈淀粉，2-8℃保存半年。

產品說明：
支鏈淀粉又稱膠淀粉，一般由幾千個葡萄糖殘基組成，淀粉中直鏈淀粉和支鏈淀粉的比例和含量對淀粉產品的加工、物化特性、糊化溫度等有著直接的影響。
支鏈淀粉和碘形成紅紫色絡合物，利用乙醇分開樣本中的可溶性糖和淀粉，再用碘與其反應得到支鏈淀粉含量。

技術指標：
低檢出限：0.0193 mg/mL
線性范圍：0.025-1 mg/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、天平、臺式離心機、微量玻璃比色皿/96孔板、可調式移液槍、研缽/勻漿器、*、無水乙醇、EP管。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）

稱取0.005g烘干樣本，加入1mL試劑一，充分勻漿；
80℃水浴提取30min，3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀；
在步驟2沉淀中加入1mL試劑二（*）振蕩 5min；3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀；
在步驟3沉淀中加入5mL試劑四充分溶解，90℃水浴10min，冷卻后3000g，25℃離心5min，取上清待測。

二、測定步驟

分光光度計/酶標儀預熱30min以上，調節(jié)雙波長至530nm和755nm，分光光度計蒸餾水調零。
標準液的稀釋：將10 mg/mL的標準溶液用試劑四稀釋至1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0.05 mg/mL標準溶液待測。
標準液稀釋可參考下表：

序號	稀釋前濃度（mg/mL）	標準液體積（µL）	試劑四體積（µL）	稀釋后濃度（mg/mL）
1	10	100	900	1
2	1	160	40	0.8
3	1	120	80	0.6
4	1	160	240	0.4
5	0.4	200	200	0.2
6	0.2	200	200	0.1
7	0.1	200	200	0.05

備注：實驗中每個標準管需40µL標準溶液。

操作表：(在1.5mL離心管中或96孔板中依次加入下列試劑)

試劑名稱	測定管	標準管	空白管
樣本（µL）	40	-	-
標準溶液（μL）	-	40	-
蒸餾水（µL）	-	-	40
試劑五（µL）	15	15	15
試劑六（µL）	10	10	10
蒸餾水（µL）	135	135	135
充分混勻，測定530nm和755nm處的吸光值，530nm下的測定管、標準管、空白管分別記為A測定、A標準和A空白，755nm下的分別記為A’測定、A’標準、A’空白，計算ΔA測定=（A測定-A空白）-（A’測定-A’空白），ΔA標準=（A標準-A空白）-（A’標準-A’空白）。標準曲線和空白管只需測定1-2次。

三、支鏈淀粉含量計算

標準曲線的建立

以支鏈淀粉標準溶液濃度為x軸（x，mg/mL），標準溶液對應的ΔA標準為y軸（y，ΔA標準），建立標準曲線，得到標準方程y=kx+b，將ΔA測定帶入方程得到x（mg/mL）。

支鏈淀粉含量（mg/g 質量）=x×V樣總÷W=5x÷W

V樣總：加入試劑四體積，5mL；W：樣本質量，g。

注意事項：

反應后建議在20min內檢測完成防止褪色。
如果測定吸光值超過線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。注意同步修改計算公式。

實驗實例：

取0.01g大米于研缽中研碎，加入1mL試劑一，進行樣本處理，取上清3倍稀釋后按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定=（A測定-A空白）-（A’測定-A’空白）=（0.351-0.059）-（0.190-0.048）=0.150，帶入標準曲線y=0.5157x+0.0089計算x=0.2736，按樣本質量計算含量得：

支鏈淀粉含量（mg/g 質量）=5x÷W×3（稀釋倍數(shù)）=410.4 mg/g質量。
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