Masson三色染色液(固綠法)

產(chǎn)品說(shuō)明：
結(jié)締組織狹義上是指其含有的三種纖維：膠原纖維、網(wǎng)狀纖維、彈力纖維，而膠原纖維(collagenfiber)是分布、含量多的一種纖維。Masson 三色染色又稱馬松染色，是結(jié)締組織染色中

的一種方法，是膠原纖維染色而經(jīng)典的技術(shù)方法。所謂三色染色通常是指染胞核和能選擇性的顯示膠原纖維和肌纖維。該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān)：分子的大小由分子量來(lái)體現(xiàn)，小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織；而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織。然而，淡綠或苯胺藍(lán)的分子量都很大，因此 Masson 染色后肌纖維呈紅色，膠原纖維呈綠色(淡綠)或藍(lán)色(苯胺藍(lán))，主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。

三色染色的特點(diǎn)：
①染色穩(wěn)定；
②分化時(shí)間短，1～2s；
③色彩清晰鮮艷；
④適用范圍廣，適宜于組織的石蠟切片、冰凍切片等染色；
⑤所染切片保存時(shí)間長(zhǎng)且不易褪色。
自備材料：
1. 固定液：選用甲醛升gong或甲醛鹽溶液
2. 系列乙醇
3. 蒸餾水
操作步驟：
1. 切片常規(guī)脫蠟水，用配制好的 Weigert 鐵蘇木素染色 5～10min。
2. 用酸性乙醇分化液分化，水洗。
3. 用 Masson 藍(lán)化液返藍(lán)，水洗。
4. 蒸餾水洗 1min。
5. 麗春紅品紅染色液染色 5～10min。
6. 在上述操作過(guò)程中按蒸餾水:弱酸溶液=2:1 比例配制弱酸工作液，用弱酸工作液洗 1min。
7. 磷鉬酸溶液洗 1～2min。
8. 用配制好的弱酸工作液洗 1min。
9. 直接入固綠染色液中染色 1～2min。
10. 用配制好的弱酸工作液洗 1min。
11. 11、95%乙醇快速脫水。無(wú)水乙醇脫水 3 次，每次 5～10s。
12. 二甲苯透明 3 次，每次 1～2min。中性樹膠封固。

染色結(jié)果：
細(xì)胞核，膠原纖維/蛋白 綠色

胞漿、肌肉、紅細(xì)胞 紅色

注意事項(xiàng)：
1. 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。固定起著重要的作用，使用不同的固定液可延或縮短染色時(shí)間。
2. 取 A1、A2 等量混合即為 Weigert 鐵蘇木素染液，一般 24h 失去染色力。
3. 酸性乙醇分化時(shí)間應(yīng)根據(jù)切片厚薄、組織的類別和新舊而定。
4. 弱酸溶液可使色彩更清晰鮮艷，如使用量大可自行配制 0.1～0.3%乙酸溶液予以替代。
5. 磷鉬酸分化時(shí)要在鏡下控制，分化到膠原纖維呈淡紅色、纖維呈紅色即可。分化時(shí)間根據(jù)染色深淺而定，一般 1～2min。
6. Masson 藍(lán)化液亦可自行配制 Scott 促藍(lán)液或 0.1～1%碳酸鋰水溶液予以替代

相關(guān)文獻(xiàn):

 《Costunolide inhibits pulmonary fibrosis via regulating NF-kB and TGF-β1/Smad2/Nrf2-NOX4 signaling pathways》 作者:Bin Liu,Yumei Rong,Dan Sun,Wuwei Li,Hong Chen,Bo Cao,Taoyuan Wang 期刊:Biochemical and Biophysical Research Communications 影響因子:2.705 PMID:30709583
《Salvanic acid B inhibits myocardial fibrosis through regulating TGF-β1/Smad signaling pathway》 作者:Hongyan Gao，Zhe Bo，Qin Wang，Ling Luo，Haiyi Zhu，Yi Ren 期刊:Biomedicine & Pharmacotherapy 影響因子:3.743 PMID:30553195
《Aldosterone induced up-expression of ICAM-1 and ET-1 in pancreatic islet endothelium may associate with progression of T2D》 作者:Jinbang Wang,Huiqing Hua,Jia Song,Fei Yan,Jun Qin,Xinghong Guo,Chen Cui,Qin He,Xinguo Hou,Fuqiang Liu,Li Chen 期刊:Biochemical and Biophysical Research Communications 影響因子:2.297 PMID:30926169
《Laminar shear stress alters endothelial KCa2.3 expression in H9c2 cells partially via regulating the PI3K/Akt/p300 axis》 作者:Guojian Li, Qionghui Yang, Yong Yang, Guokai Yang, Jia Wan, Zhenhuan Ma, Lingjuan Du, Yi Sun, and Guimin Zhang 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影響因子:2.928 PMID:30664154
《Effects of cholecalciferol cholesterol emulsion on renal fibrosis and aquaporin 2 and 4 in mice with unilateral ureteral obstruction》 作者:N Liu, Y Zhang, H Su, J Wang, Z Liu, J Kong 期刊:Biomedicine & Pharmacotherapy 影響因子:3.457 PMID:29602131
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《Emodin alleviates cardiac fibrosis by suppressing activation of cardiac fibroblasts via upregulating metastasis associated protein 3》 作者:Dan Xiao,Yue Zhang,Rui Wang,Yujie Fu,Tong Zhou,Hongtao Diao,Zhixia Wang,Yuan Lin,Zhange Li,Lin Wen,Xujuan Kang,Philipp Kopylov,Dmitri Shchekochikhin,Yong Zhang,Baofeng Yang 期刊:Acta Pharmaceutica Sinica B 影響因子:5.808 PMID:
《Quercetin inhibits kidney fibrosis and the epithelial to mesenchymal transition of the renal tubular system involving suppression of the Sonic Hedgehog signaling pathway》 作者:Xianghua Liu,Ning Sun, Nan Mo,  Shan Lu,  Eli Song,  Chuanchuan Rend  and  Zhenzhen Li 期刊:Food & Function 影響因子:3.241 PMID:31180394
《Reconstruction of large segmental bone defects in rabbit using the Masquelet technique with α-calcium sulfate hemihydrate》 作者:Zhu Long Meng, Zi Quan Wu, Bi Xin Shen, Hong Bo Li, Yang Yang Bian, De Lu Zeng, Jian Fu and Lei Peng 期刊:Journal of Orthopaedic Surgery and Research 影響因子:2.776 PMID:31242906
《The role and mechanism of transforming growth factor beta 3 in human myocardial infarction‐induced myocardial fibrosis》 作者:Ke Xue , Jun Zhang , Cong Li , Jing Li , Cong Wang,  Qingqing Zhang,  Xianlu Chen , Xiaotang Yu , Lei Sun ,Xiao Yu 期刊:Journal of Cellular and Molecular Medicine 影響因子:4.658 PMID:30983140
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注意事項(xiàng)：
1. 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。固定起著重要的作用，使用不同的固定液可延或縮短染色時(shí)間。
2. 取 A1、A2 等量混合即為 Weigert 鐵蘇木素染液，一般 24h 失去染色力。
3. 酸性乙醇分化時(shí)間應(yīng)根據(jù)切片厚薄、組織的類別和新舊而定。
4. 弱酸溶液可使色彩更清晰鮮艷，如使用量大可自行配制 0.1～0.3%乙酸溶液予以替代。
5. 磷鉬酸分化時(shí)要在鏡下控制，分化到膠原纖維呈淡紅色、纖維呈紅色即可。分化時(shí)間根據(jù)染色深淺而定，一般 1～2min。
6. Masson 藍(lán)化液亦可自行配制 Scott 促藍(lán)液或 0.1～1%碳酸鋰水溶液予以替代

注意事項(xiàng)：
1. 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。固定起著重要的作用，使用不同的固定液可延或縮短染色時(shí)間。
2. 取 A1、A2 等量混合即為 Weigert 鐵蘇木素染液，一般 24h 失去染色力。
3. 酸性乙醇分化時(shí)間應(yīng)根據(jù)切片厚薄、組織的類別和新舊而定。
4. 弱酸溶液可使色彩更清晰鮮艷，如使用量大可自行配制 0.1～0.3%乙酸溶液予以替代。
5. 磷鉬酸分化時(shí)要在鏡下控制，分化到膠原纖維呈淡紅色、纖維呈紅色即可。分化時(shí)間根據(jù)染色深淺而定，一般 1～2min。
6. Masson 藍(lán)化液亦可自行配制 Scott 促藍(lán)液或 0.1～1%碳酸鋰水溶液予以替代

注意事項(xiàng)：
1. 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。固定起著重要的作用，使用不同的固定液可延或縮短染色時(shí)間。
2. 取 A1、A2 等量混合即為 Weigert 鐵蘇木素染液，一般 24h 失去染色力。
3. 酸性乙醇分化時(shí)間應(yīng)根據(jù)切片厚薄、組織的類別和新舊而定。
4. 弱酸溶液可使色彩更清晰鮮艷，如使用量大可自行配制 0.1～0.3%乙酸溶液予以替代。
5. 磷鉬酸分化時(shí)要在鏡下控制，分化到膠原纖維呈淡紅色、纖維呈紅色即可。分化時(shí)間根據(jù)染色深淺而定，一般 1～2min。
6. Masson 藍(lán)化液亦可自行配制 Scott 促藍(lán)液或 0.1～1%碳酸鋰水溶液予以替代

注意事項(xiàng)：
1. 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。固定起著重要的作用，使用不同的固定液可延或縮短染色時(shí)間。
2. 取 A1、A2 等量混合即為 Weigert 鐵蘇木素染液，一般 24h 失去染色力。
3. 酸性乙醇分化時(shí)間應(yīng)根據(jù)切片厚薄、組織的類別和新舊而定。
4. 弱酸溶液可使色彩更清晰鮮艷，如使用量大可自行配制 0.1～0.3%乙酸溶液予以替代。
5. 磷鉬酸分化時(shí)要在鏡下控制，分化到膠原纖維呈淡紅色、纖維呈紅色即可。分化時(shí)間根據(jù)染色深淺而定，一般 1～2min。
6. Masson 藍(lán)化液亦可自行配制 Scott 促藍(lán)液或 0.1～1%碳酸鋰水溶液予以替代

注意事項(xiàng)：
1. 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。固定起著重要的作用，使用不同的固定液可延或縮短染色時(shí)間。
2. 取 A1、A2 等量混合即為 Weigert 鐵蘇木素染液，一般 24h 失去染色力。
3. 酸性乙醇分化時(shí)間應(yīng)根據(jù)切片厚薄、組織的類別和新舊而定。
4. 弱酸溶液可使色彩更清晰鮮艷，如使用量大可自行配制 0.1～0.3%乙酸溶液予以替代。
5. 磷鉬酸分化時(shí)要在鏡下控制，分化到膠原纖維呈淡紅色、纖維呈紅色即可。分化時(shí)間根據(jù)染色深淺而定，一般 1～2min。
6. Masson 藍(lán)化液亦可自行配制 Scott 促藍(lán)液或 0.1～1%碳酸鋰水溶液予以替代 

Masson三色染色液(固綠法)