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當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心生化檢測(cè)試劑盒-常量法輔酶Ⅰ系列BC0650-50T/48S單脫氫抗壞血酸還原酶測(cè)試盒 輔酶系

單脫氫抗壞血酸還原酶測(cè)試盒 輔酶系
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

儲(chǔ)存條件
-20℃
中文名稱
單脫氫抗壞血酸還原酶測(cè)試盒 輔酶系
有效期
6個(gè)月
單位
盒
英文名稱
Monodehydroascorbate Reductase(MDHAR) Activity Assay Kit
檢測(cè)方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品型號(hào):BC0650-50T/48S

更新時(shí)間:2024-04-24

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問(wèn) 量 :1782

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產(chǎn)品介紹

單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
紫外分光光度法
貨號(hào):BC0650
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體60 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一液體30mL×1瓶2-8℃保存
試劑二粉劑×1瓶2-8℃保存
試劑三粉劑×1瓶-20℃保存
試劑四液體×1瓶-20℃保存

溶液的配制:

  1. 試劑二:臨用前加入5 mL蒸餾水充分溶解,2-8℃保存;

  2. 試劑三:臨用前加入5 mL蒸餾水充分溶解,可溶解后分裝-20℃保存,避免反復(fù)凍融;

  3. 試劑四:液體置于試劑瓶?jī)?nèi)EP管中。臨用前加5 mL試劑一充分溶解,可溶解后分裝-20℃保存,避免反復(fù)凍融。

產(chǎn)品說(shuō)明:
MDHAR催化MDHA還原生成AsA,在抗壞血酸氧化還原代謝中具有重要作用。
MDHAR催化NADH還原MDHA生成AsA和NAD+,NADH在340nm有特征吸收峰,但是NAD+沒有。通過(guò)測(cè)定340 nm光吸收下降速率,來(lái)計(jì)算出MDHAR活性。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
研缽/勻漿器、冰、臺(tái)式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液槍和雙蒸水。
操作步驟:“具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件"
注意事項(xiàng):
當(dāng)ΔA測(cè)定大于0.3時(shí),建議客戶稀釋樣本或者調(diào)整試劑一和上清液的比例(如將400μL試劑一+300μL上清液改為600μL試劑一+100μL上清液)后進(jìn)行測(cè)定。
當(dāng)ΔA測(cè)定過(guò)小時(shí),建議客戶提高樣本量或者調(diào)整試劑一和上清液的比例(如將400μL試劑一+300μL上清液改為200μL試劑一+500μL上清液)。
當(dāng)A1大于1.5時(shí),建議將樣本稀釋進(jìn)行測(cè)定。
空白管為檢測(cè)各管試劑組份的檢測(cè)孔,正常情況下,其OD值在0.5左右,變化不超過(guò)0.01。
由于提取液中含有一定濃度的蛋白(約1mg/mL),所以在測(cè)定樣品蛋白濃度時(shí)需要減去提取液本身的蛋白含量。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

  1. 取0.1g橙子果肉加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿。10000rpm,4℃離心10min,取上清置冰上,按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定管=A1測(cè)定-A2測(cè)定=0.827-0.8=0.027,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.536-0.532=0.004,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:

MDHAR 活性(U/g 質(zhì)量) =0.268×(ΔA測(cè)定管-ΔA空白管) ÷W=0.268×(0.027-0.004) ÷0.1=0.06164U/g 質(zhì)量。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn):

  1. Yali Zhou,Sufang Huo,Liting Wang,et al. Exogenous 24-Epibrassinolide alleviates oxidative damage from copper stress in grape (Vitis vinifera L.) cuttings. Plant Physiology and Biochemistry. September 2018;(IF3.404)

相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC1230/BC1235 抗壞血酸(AsA)含量檢測(cè)試劑盒
BC1240/BC1245 脫氫抗壞血酸(DHA)含量檢測(cè)試劑盒

單脫氫抗壞血酸還原酶測(cè)試盒 輔酶系  單脫氫抗壞血酸還原酶測(cè)試盒 輔酶系


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