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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心生化檢測試劑盒-常量法抗氧系列BC1380-50T/24S植物花色苷含量檢測試劑盒 抗氧化

植物花色苷含量檢測試劑盒 抗氧化
產(chǎn)品簡介:

儲存條件
2-8℃
中文名稱
植物花色苷含量檢測試劑盒 抗氧化
有效期
6個月
單位
盒
英文名稱
Plant Anthocyanin Content Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/24S

產(chǎn)品型號:BC1380-50T/24S

更新時間:2024-04-07

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :1920

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品介紹

植物花色苷含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號:BC1380
規(guī)格:50T/24S
產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體30 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一液體30 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二液體30 mL×1瓶2-8℃保存

產(chǎn)品說明:
花色苷是一類可食用的易溶于水等溶劑的天然色素?;ㄉ帐怪参锍尸F(xiàn)多彩的顏色,本身更具有多種保健作用,因而在天然食用色素、保健品和醫(yī)藥行業(yè)都有著廣闊的應(yīng)用前景。


根據(jù)花色苷在不同pH下的結(jié)構(gòu)性質(zhì)測定花色苷含量,在pH為1時花色苷在530nm處有最大吸收峰,而當(dāng)pH為4.5時,花色苷轉(zhuǎn)變?yōu)闊o色查爾酮形式在530nm處無吸收峰,通過測定不同pH下的530nm和700nm處的吸光度值計算樣本中花色苷的含量。
 注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
按照樣本質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10的比例(建議稱取約 0.1g樣本,加入1mL提取液),充分勻漿后轉(zhuǎn)移到EP管中, 封口膜封口防止揮發(fā),60℃浸提30min,期間可震蕩數(shù)次,提取后提取液定容至1mL。12000rpm,常溫離心10min,取上清液待測。
二、測定步驟

  1. 可見分光光度計預(yù)熱30min以上,蒸餾水調(diào)零。

  2. 加樣表:

試劑名稱(μL)測定管1測定管2
樣本100100
試劑一900-
試劑二-900

充分混勻后測定測定管1和測定管2分別在530nm和700nm處的吸光度,測定管1在530nm和700nm處的吸光值記為A1、A1’,測定管2在530nm和700nm處的吸光值記為A2、A2’,計算ΔA=(A1-A1’)-(A2-A2’)。

三、花色苷含量計算

  1. 按樣本質(zhì)量計算

花色苷含量(μmol/g 質(zhì)量)=[ΔA÷(ε×d)×103×F] ×V提取÷W=0.037×ΔA×F÷W

  1. 按樣本蛋白濃度計算

花色苷含量(μmol/mg prot)=[ΔA÷(ε×d)×103×F] ×V提取÷(Cpr ×V提取)=0.037×ΔA×F÷Cpr
F:稀釋倍數(shù),該反應(yīng)體系下為10;d:比色皿光徑,1cm;W:樣本質(zhì)量,g;ε:花色苷的摩爾消光系數(shù),2.69×104mL/mmol/cm;V提?。禾崛∫嚎傮w積,1mL;103:單位換算系數(shù),1mmol=103μmol;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL(蛋白濃度需用PBS單獨提取后自行測定)。
注意事項:

  1. 如果A1大于1,可以適當(dāng)加大稀釋倍數(shù),保證總體積1mL不變,如50μL上清液和950μL試劑一(相當(dāng)于稀釋20倍);如果A1小于0.1,可以適當(dāng)縮小稀釋倍數(shù),保證總體積不變,如500μL上清液和500μL試劑一(相當(dāng)于稀釋 2 倍),使A1保持在0.1~1范圍內(nèi),可提高檢測靈敏度;注意應(yīng)同樣調(diào)整上清液和試劑二體積比例;計算時以實際稀釋倍數(shù)代入計算公式中。

  2. 因提取液會使蛋白變性,若使用蛋白濃度計算需用PBS單獨提取后自行測定。

實驗實例:

  1. 取0.1g西梅皮加入1mL提取液充分勻漿后轉(zhuǎn)移到EP管中,封口膜封口防止揮發(fā),60℃浸提30min,期間可震蕩數(shù)次,提取后提取液定容至1mL,離心取上清后按照測定步驟操作,測得計算ΔA=(A1-A1’)-(A2-A2’)=(0.249-0.101)-(0.133-0.065)=0.08,按樣本質(zhì)量計算含量得:花色苷含量(μmol/g質(zhì)量)=0.037×ΔA× F÷W =0.037×0.08×10÷0.1=0.296 μmol/g 質(zhì)量。

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