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琥珀酸脫氫酶(SDH)活性檢測(cè)試劑盒 三羧循環(huán)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

儲(chǔ)存條件
-20℃
中文名稱
琥珀酸脫氫酶(SDH)活性檢測(cè)試劑盒 三羧循環(huán)
有效期
6個(gè)月
單位
盒
英文名稱
Glutamine Synthetase(GS) Activity Assay Kit
檢測(cè)方法
可見(jiàn)分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/24S

產(chǎn)品型號(hào):BC0950-50T/48S

更新時(shí)間:2024-04-24

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問(wèn) 量 :2480

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琥珀酸脫氫酶(SDH)活性檢測(cè)試劑盒 三羧循環(huán)  琥珀酸脫氫酶(SDH)活性檢測(cè)試劑盒 三羧循環(huán)


琥珀酸脫氫酶(SDH)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
可見(jiàn)分光光度法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書操作。
貨號(hào):BC0950
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
試劑一液體60 mL×1瓶-20℃保存
試劑二液體0.6 mL×1支-20℃保存
試劑三液體5 mL×1瓶2-8℃保存
試劑四液體4mL×1瓶2-8℃保存
試劑五液體3mL×1瓶2-8℃保存

溶液的配制:

  1. 試劑二:為易揮發(fā)試劑,用完后盡快密封,-20℃保存;

產(chǎn)品說(shuō)明:
SDH(EC 1.3.5.1)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中。SDH是線粒體的一種標(biāo)志酶,位于線粒體內(nèi)膜上的一種膜結(jié)合酶,是連接呼吸電子傳遞和氧化磷酸化的樞紐之一。此外,為多種原核細(xì)胞產(chǎn)能的呼吸鏈提供電子。

SDH催化琥珀酸脫氫生成延胡索酸,脫下的氫通過(guò)吩嗪二甲酯硫酸(PMS)傳遞還原*(DCPIP),并且在600nm處具有特征吸收峰,通過(guò)600nm吸光度的變化,測(cè)定2,6-DCPIP的還原速度,代表SDH酶活性。

注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件

注意事項(xiàng):

  1. 測(cè)定過(guò)程中所有試劑和樣本在冰上放置,以免變性失活。

  2. 若ΔA大于0.5,需將酶液用酶提取液稀釋,使ΔA小于0.5,可提高檢測(cè)靈敏度。計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

  3. 由于提取液中含有一定濃度的蛋白(約1mg/mL),所以測(cè)定樣品蛋白濃度時(shí)需要減去提取液本身的蛋白含量。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

  1. 取0.1g腎臟加入1mL試劑一和10uL試劑二,用冰浴勻漿器勻漿充分研磨,4 ℃ 11000g離心10min,取上清置冰上。按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A1測(cè)定-A2測(cè)定=0.82-0.681=0.139,ΔA空白=A1空白-A2空白=0.905-0.904=0.001,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:

SDH活性(U/g 質(zhì)量)=1571.111×(ΔA測(cè)定-ΔA空白)÷W=2168.13 U/g 質(zhì)量。
參考文獻(xiàn):

  1. Fattoretti P, Bertoni-Freddari C, Caselli U, et al. Impaired succinic dehydrogenase activity of rat Purkinje cell mitochondria during aging[J]. Mechanisms of ageing and development, 1998, 101(1-2): 175-182.

相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC0710/BC0715 α-酮戊二酸脫氫酶(α-KGDH)活性檢測(cè)試劑盒
BC2150/BC2155 檸檬酸(CA)含量檢測(cè)試劑盒
BC0380/BC0385 *酸脫氫酶(PDH)活性檢測(cè)試劑盒




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