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產(chǎn)品中心生化檢測(cè)試劑盒-常量法糖酵解系列BC2230-50T/24S乳酸含量（LA）檢測(cè)試劑盒 糖酵解系列
產(chǎn)品型號(hào)：BC2230-50T/24S
更新時(shí)間：2024-04-08
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
訪 問 量 ：5090
010-50973130
產(chǎn)品分類
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可見分光光度法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號(hào)：BC2230
規(guī)格：50T/24S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
| 試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
| 提取液一 | 液體30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 提取液二 | 液體5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑一 | 液體20 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二 | 液體60 μL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑三 | 液體24mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑四 | 粉劑×1瓶 | -20℃保存 |
| 試劑五 | 液體5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
試劑二：臨用前按試劑二（V）：蒸餾水（V）=10μL：450μL的比例配制試劑二溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配；
試劑四：臨用前每瓶加入8 mL 蒸餾水混勻，可分裝后-20℃保存，避免反復(fù)凍融，-20℃保存4周；
標(biāo)準(zhǔn)品：臨用前加入1.04 mL蒸餾水配成100 μmol/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液；2-8℃保存4周。
產(chǎn)品說明：
乳酸是生物體代謝過程中重要的中間產(chǎn)物，與糖代謝、脂類代謝、蛋白質(zhì)代謝及細(xì)胞內(nèi)能量代謝密切相關(guān)，乳酸含量是評(píng)估糖元代謝的和有氧代謝的重要指標(biāo)。乳酸在乳酸脫氫酶的作用下生成*酸，同時(shí)使NAD+還原生成NADH和H+，H+傳遞給PMS生成的PMSH2還原MTT生成紫色物質(zhì)，在570nm處有特征吸收峰。
技術(shù)指標(biāo)：
低檢出限：0.0387 μmol/mL
線性范圍：0.039-1 μmol/mL
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
天平、研缽/勻漿器、離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋或者恒溫培養(yǎng)箱、乙醇和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：
如果測(cè)定吸光值超過線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。
提取液一中含有蛋白質(zhì)沉淀劑，因此上清液不能用于蛋白濃度測(cè)定。如需測(cè)定蛋白含量，需另取樣本。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：
取0.1g兔心加入1mL提取液一進(jìn)行勻漿研磨離心，取0.8mL上清后加0.15mL提取液二，離心取上清后稀釋5倍，之后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=1.137-0.125=1.012，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.7826x+0.0215，計(jì)算x=1.266，按樣本質(zhì)量計(jì)算含量得：
L-LA含量（μmol/g 質(zhì)量）=1.1875×x÷W×稀釋倍數(shù)= 1.1875×1.266÷0.1×5=75.17 μmol/g質(zhì)量。
取100μL小鼠血清加入1mL提取液一，取0.8mL上清后加0.15mL提取液二，離心取上清，之后按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管=1.152-0.407=0.745，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.7826x+0.0215，x=0.924，按照液體體積計(jì)算含量得：
L-LA含量（μmol/mL）= 13.0625×x=13.0625×0.924=12.07 μmol/mL。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：
Meixi Peng,Dan Yang,Yixuan Hou,et al.Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion and metastasis. Cell Death and Disease. March 2019;(IF5.959)
Xiaojin Luo,Weihua Shi，Haoming Yu,et al. Wearable Carbon Nanotube-Based BioSensors on Gloves for Lactate. Sensors. October 2018;(IF3.031)
Zhou F, Du J, Wang J. Albendazole inhibits HIF-1α-dependent glycolysis and VEGF expression in non-small cell lung cancer cells[J]. Molecular and cellular biochemistry, 2017, 428(1-2): 171-178.
參考文獻(xiàn)：
[1] Jin Bingjun, Li Taiyuan, Zhang Chunfeng. Determination of lactic acid concentration in bovine blood by enzymatic method [J]. Chinese Journal of Veterinary Medicine, 1990, 16(07): 23-25. [2] Eolbergrová J, MacMillan V, Siesj? B K. The effect of moderate and marked hypercapnia upon the energy state and upon the cytoplasmic NADH/NAD+ ratio of the rat brain[J]. Journal of neurochemistry, 1972, 19(11): 2497-2505.
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