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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心生化檢測(cè)試劑盒-常量法土壤系列BC0285-100T/96S土壤堿性磷酸酶(S-AKP/ALP)活性檢測(cè)試劑盒

土壤堿性磷酸酶(S-AKP/ALP)活性檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

儲(chǔ)存條件
2-8℃
中文名稱
土壤堿性磷酸酶(S-AKP/ALP)活性檢測(cè)試劑盒
有效期
6個(gè)月
單位
盒
英文名稱
Soil Alkaline Phosphatase(S-AKP/ALP) Activity Assay Kit
檢測(cè)方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規(guī)格
100T/96S
自備試劑
該試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中需自備試劑,詳情見網(wǎng)站說明書

產(chǎn)品型號(hào):BC0285-100T/96S

更新時(shí)間:2024-04-09

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :2191

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產(chǎn)品介紹


土壤堿性磷酸酶(S-AKP/ALP)活性檢測(cè)試劑盒說明書
微量法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號(hào):BC0285
規(guī)格:100T/96S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
試劑一液體42 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二粉劑×1瓶2-8℃保存
試劑三液體2.5 mL×1瓶2-8℃保存
試劑四粉劑×2支2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品液體1 mL×1支2-8℃保存

溶液的配制:

  1. 試劑二:臨用前加100 mL蒸餾水充分溶解,2-8℃保存8周;

  2. 試劑四:臨用前取1支加576 μL無水乙醇(自備),24 μL蒸餾水充分溶解。用不完的試劑2-8℃保存一周(變褐色后不能再使用,一瓶即可以實(shí)驗(yàn)100T,為延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間故多給一瓶);

  3. 標(biāo)準(zhǔn)品:0.5 μmol/mL*酚標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說明:
土壤磷酸酶是一類催化土壤有機(jī)磷礦化的酶,其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性,是評(píng)價(jià)土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo)。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響,根據(jù)最適pH范圍,通常分為酸性、中性和堿性三種類型。

堿性環(huán)境中,S-AKP/ALP催化磷酸苯二鈉水解生成*酚和磷酸*二鈉,通過測(cè)定酚的生成量即可計(jì)算出S-AKP/ALP活性。
 

注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、研缽、蒸餾水、30-50目篩、乙醇和甲苯(不允許快遞)。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))
1. 新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干,過30~50目篩。
2. 稱取風(fēng)干混勻土壤約0.1g,加入0.05mL甲苯(自備),輕搖15min;加0.4mL試劑一并且搖勻后,置于37℃水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱,開始計(jì)時(shí),催化反應(yīng)24h;到時(shí)后迅速加入1mL試劑二充分混勻,以終止酶催化的反應(yīng)。

10000rpm室溫離心10min,取上清液置于冰上待測(cè)。
二、測(cè)定步驟

  1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到660nm,分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。

  2. 空白管:取微量比色皿/96孔板,加入10μL試劑一,20μL試劑三,4μL試劑四,充分混勻,顯色后再加蒸餾水166μL,混勻后室溫靜置30min,于660nm測(cè)定吸光度,記為A空白管。(空白管只需要測(cè)定1-2次)

  3. 標(biāo)準(zhǔn)管:取微量比色皿/96孔板,加入10μL標(biāo)準(zhǔn)液,20μL試劑三,4μL試劑四,充分混勻,顯色后再加蒸餾水166μL,混勻后室溫靜置30min,于660nm測(cè)定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。(標(biāo)準(zhǔn)管只需要測(cè)定1-2次)

  4. 測(cè)定管:取微量比色皿/96孔板,加入10μL上清液,20μL試劑三,4μL試劑四,充分混勻,顯色后再加蒸餾水166μL,混勻后室溫靜置30min,于660nm測(cè)定吸光度,記為A測(cè)定管。

三、S-AKP/ALP活性計(jì)算
活性單位定義:37℃中每克土壤每天釋放1nmol酚為1個(gè)酶活單位。
S-AKP/ALP活性(U/g 土樣)=[C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)]×V總÷W÷T×1000
=725×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W
C標(biāo)準(zhǔn)液:0.5μmol/mL;V總:催化體系總體積,1.45mL;W:土壤樣本質(zhì)量,g;T:催化反應(yīng)時(shí)間,24 h=1d;1000:?jiǎn)挝粨Q算系數(shù),1μmol=1000nmol。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn):

  1. Liu B, Wang S, Wang J, et al. The great potential for phytoremediation of abandoned tailings pond using ectomycorrhizal Pinus sylvestris[J]. Science of The Total Environment, 2020, 719: 137475.

  2. Shao T, Zhao J J, Liu A, et al. Effects of soil physicochemical properties on microbial communities in different ecological niches in coastal area[J]. Applied Soil Ecology, 2020: 103486.

參考文獻(xiàn):

  1. Guan S. Soil Enzyme and Its Research Method [M]. Beijing: Science Press, 1982.

相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC0120/BC0125 土壤脲酶(S-UE)活性檢測(cè)試劑盒
BC0110/BC0115 土壤多酚氧化酶(S-PPO)活性檢測(cè)試劑盒
BC0160/BC0165 土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)活性檢測(cè)試劑盒
BC0890/BC0895 土壤過氧化物酶(S-POD)活性檢測(cè)試劑盒

土壤堿性磷酸酶(S-AKP/ALP)活性檢測(cè)試劑盒 

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