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當前位置:首頁產(chǎn)品中心生化檢測試劑盒-常量法糖代謝系列BC0820-50T/24S幾丁質(zhì)酶活性檢測試劑盒 糖代謝系列

幾丁質(zhì)酶活性檢測試劑盒 糖代謝系列
產(chǎn)品簡介:

儲存條件
-20℃
中文名稱
幾丁質(zhì)酶活性檢測試劑盒 糖代謝系列
有效期
6個月
單位
盒
英文名稱
Acetaldehyde Dehydrogenase(ALDH) Activity Assay Kit
檢測方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品型號:BC0820-50T/24S

更新時間:2024-07-09

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :1902

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010-50973130

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產(chǎn)品介紹


幾丁質(zhì)酶活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號:BC0820
規(guī)格:50T/24S
產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體30 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一液體15mL×1瓶2-8℃保存
試劑二液體12 mL×1瓶2-8℃保存
試劑三液體5mL×1瓶2-8℃保存
試劑四A粉劑×2瓶2-8℃保存
試劑四B液體70mL×1瓶2-8℃保存
標準品粉劑×1支2-8℃保存
溶液的配制:
  1. 試劑二:此試劑為懸濁液,使用前需搖勻;

  2. 試劑三:飽和溶液,低溫(2-8℃)條件取出會有晶體析出,60℃加熱使其溶解即可;

  3. 試劑四:臨用前取一瓶試劑四A,加入32mL試劑四B中,充分溶解,現(xiàn)用現(xiàn)配。用不完的試劑2-8℃可以保存4周(試劑四B若有結(jié)晶可37℃促進溶解);

  4. 標準品:5mg N-乙酰氨基葡萄糖。臨用前加入 1mL 試劑一配制成 5mg/mL 的標準溶液,即5000μg/mL的標準溶液,2-8℃可以保存4 周。

產(chǎn)品說明:
幾丁質(zhì)酶主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官(例如烏賊的軟骨),以及真菌類的細胞壁中。而幾丁質(zhì)酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質(zhì)水解,具有抵御真菌侵染的作用,成為抗真菌病害的研究熱點。
幾丁質(zhì)酶水解幾丁質(zhì)產(chǎn)生N-乙酰氨基葡萄糖,N-乙酰氨基葡萄糖與堿共熱產(chǎn)生的中間化合物可進一步與對二甲*甲醛反應產(chǎn)生顯色物質(zhì),該顯色物質(zhì)在585nm處有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了幾丁質(zhì)酶的活性。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、低溫離心機、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液槍、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

注意事項:
  1. 反應結(jié)束后盡快進行比色。

  2. 吸光值大于1.5或者ΔA大于1時,樣本用提取液適當稀釋再測定或者縮短37℃酶促反應時間,注意計算公式修改;若ΔA小于0.01時,可以延長第一步37℃反應時間或者加大樣本的加入量,注意修改計算公式。

實驗實例:
  1. 取0.111g蝦殼加入1mL提取液進行勻漿研磨,取上清后按照測定步驟操作,測得計算ΔA=A測定-A對照=0.767-0.008=0.759,帶入標曲y=0.0087x+0.0021,得出x=87.0μg/mL,按樣本質(zhì)量計算酶活得:

幾丁質(zhì)酶活性(U/g 質(zhì)量)=2.5×x÷W =1959.5 U/g 質(zhì)量。
  1. 取0.113g平菇加入1mL提取液進行勻漿研磨,取上清后按照測定步驟操作,測得計算ΔA=A測定-A對照=0.918-0.01=0.908,帶入標曲y=0.0087x+0.0021,得出x=104.126μg/mL,按樣本質(zhì)量計算酶活得:

幾丁質(zhì)酶活性(U/g 質(zhì)量)=2.5×x÷W =2303.7 U/g 質(zhì)量。
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